Agentes reductores en la formación de testosterona por Mycobacterium sp. NRRL B-3683 y Saccharomyces cerevisiae 196-2

Resumen

Muchos géneros de microorganismos, incluyendo Mycobacterium, Arthobacter, Corynebacterium, etc., son capaces de utilizar los esteroles como fuente de carbono. El empleo de varios mutantes degradadores de esteroles ha permitido la producción de androstanos de amplio interés tales como: 4-androsteno-3,17-diona (AD) y 1,4-androstadieno-3,17-diona (ADD). La reducción enzimética del AD y ADD ha sido encontrada no sólo en microorganismos, sino también, en células animales. La transformación de AD y ADD por Saccharomyces cerevisiae 196-2 y Mycobacterium sp . NRRL B-3683, respectivamente rinde como producto final testosterona . Con el propósito de incrementar la formación de 17-hidroxiesteroides, se adicionó a la reacción hidroquinona y ácido ascórbico, como donantes externos de protones, a diferentes concentraciones: ácido ascórbico 4,83 • 10^-3 y 4,83 • 10^-4 mol/L e hidroquinona 5,0 • 10 -1 y 5,0 • 10" mol/L . Las reacciones fueron también realizadas en presencia de glucosa 2 %. El volumen total del sistema de reacción fue de 1 mL. Los tubos de ensayo fueron colocados en zaranda orbital a 115 r/min y 30^°C. Una vez transcurrida la reacción, cada muestra fue extrañda con acetato de etilo y secada a temperatura ambiente. Finalmente, el residuo fue disuelto en metanol y analizado por cromatografia líquida de alta resolución a 254 nm. Tanto el ácido ascórbico como la hidroquinona (5,0 • 10^-3 mol/L) actuaron como activadores de las reacciones de reducción en ambas cepas. La glucosa tuvo un efecto sinergístico. Estos compuestos exógenos garantizaron el complejo activo enzima-cofactor asociado con una elevada concentración de NADH en la célula.