Obtención y producción de un anticuerpo monoclonal específico a la gonadotropina coriónica humana y su aplicación en el ultramicroelisa
Resumen
La gonadotropina coriónica humana (GCH) es una glicoproteína compleja producida por la placenta después de la implantación del huevo fertilizado en la pared uterina. La molécula de GCH está formada por dos subunidades unidas no covalentemente: la subunidad alfa (α) y la beta (β); la primera presenta una secuencia aminoacídica muy similar a las de las hormonas luteinizante, folículo estimulante y estimulante de la tiroides, por lo que la especificidad antigénica de esta hormona reside en la subunidad β. Los linfocitos B del ratón BALB/C, inmunizado con gonodotropina coriónica (cadena β), se fusionaron con células de mieloma de ratón P3/X63-Ag8 para obtener un hibridoma secretor de anticuerpos monoclonales, el cual fue seleccionado para estudios posteriores. Se realizó el ensayo de la reactividad cruzada para las hormonas peptídicas: luteinizante, folículo estimulante y estimulante de la tiroides y se comprobó que el AcM FIV GHC/ 4G1-C5 (IgGl) fue específico para la gonadotropina coriónica humana y no reaccionó frente al resto de las hormonas. El líquido ascítico proveniente de este hibridoma fue purificado por proteína A Sepharosa CL-4B para obtener la fracción activa IgGl. El anticuerpo monoclonal purificado se utilizó para recubrir placas de UltramicroELISA en el UMELISA hCG, lo que garantizó una buena sensibilidad, especificidad y reproducibilidad del ensayo, para la detección y determinación de GCH en orina y suero, respectivamente. La introducción en la producción de este monoclonal garantiza la calidad de este juego diagnóstico y además, representa un ahorro de divisas.
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