Métodos para investigación del virus del mosaico del tabaco mediante el microscopio electrónico.

Resumen

Se describe el método utilizado para purificar el virus del mosaico del tabaco (VMT) por medio de sulfato de amonio, antisuero y ultracentrifugación. Fue utilizado además, virus sin purificar obtenido· por el método del exudado, con buenos resultados. Se prepararon muestras para microscopía electrónica por evaporación de Pd y C-Pt, doble fijación (glutaraldehido-osmio) y tinción negativa (PTA al 2%). Se obtuvo virus precipitado por antisuero, el que fue separado por centrifugación a 4000 g/20 minutos, fijado en glutaraldehido al 3%, post-fijado en OsO₄. al 2% y se incluyó en una mezcla de EPON según Luft (1961). Por el método de doble tinción se estudió la frecuencia de agrupamiento de los viriones del VMT por antisuero específico. Sin embargo, viriones purificados por medio de sulfato de amonio y sin purificar, en tinción negativa, permitieron un estudio mejor de la ultraestructura de los mismos. Los resultados obtenidos por tinción negativa de virus purificados y sin purificar, no presentaron una diferencia significativa. Se discute y comparan diferentes métodos de preparación de muestras y los resultados obtenidos por métodos de microscopía electrónica.