Diferencia en la viabilidad y estabilidad genética de mutantes de Escherichia coli crioconservados mediante un mismo método

Resumen

La Unión de Colecciones de Microorganismos de Rusia (VKM) utiliza una técnica simple para la congelación de células microbianas sobre gel de sílice, la cual aplica desde el año 1991 para preservar bacterias, hongos y levaduras de diversas especies. El objetivo de este trabajo fue determinar si este método es aplicable a diferentes mutantes de E. coli que se utilizan comúnmente como hospederos en la expresión de proteínas recombinantes. Con este propósito, se estudió el comportamiento de dos indicadores: la viabilidad de los cultivos conservados y la estabilidad de los marcadores genéticos en 21 cepas de E. coli K12, después de la liofilización sobre gel de sílice a los 30, 60 y 90 d de almacenamiento a -70 OEC. La estabilidad de las cepas en estudio fue diferente. Las cepas que contenían mutaciones recA o recBC fueron más susceptibles a los daños que produce esta forma de conservación. Un estudio de la cepa HB101 transformada con diferentes plasmidios sugiere que la viabilidad, pero no la estabilidad genética depende de la información que portan los plasmidios. La forma de conservación dependió de la cepa, sobre todo, si estaban transformadas con plasmidios. En este caso, el método no es aplicable sin un estudio previo de estabilidad en tiempo real; debido a que la susceptibilidad a la conservación varía en dependencia del plasmidio introducido, según evidenció el estudio en la cepa HB101 de uso común en los trabajos de donación de muchos laboratorios.