Aislamiento, purificación y caracterización parcial de la C-ficocianina-620 obtenida a partir de la Spirulina platensis

Resumen

La Spirulina platensis posee gran cantidad de ficobiliproteínas, dentro de las que se hayan la ficocianina y la aloficocianina, las cuales se asocian para formar complejos macromoleculares denominados ficobilisomas. Las ficobiliproteínas son pigmentos-proteínas coloreados y fluorescentes que forman parte de los complejos antenas cosechadores de luz de cianobacterias (algas verdes-azules). Estas cromoproteínas tienen unido covalentemente tetrapirroles lineales, las bilinas, relacionadas estructuralmente con la biliverdina. Las ficobiliproteínas por sus propiedades fluorescentes son utilizadas en la industria, en la biotecnología y en la medicina. El método de extracción de ficobiliproteínas de la biomasa de Spirulina platensis utilizado fue el de congelación-descongelación a -20°C. La C-ficocianina se purifica por cromatografía de intercambio aniónico en gel DEAE Sepharosa Fast Flow y posteriormente, se comprueba su pureza mediante una electroforesis en gel de poliacrilamida (8 a un 25 %) y una cromatografía líquida de alta presión. Para la caracterización parcial del hexámero de C-ficocianina, se disocian sus subunidades alfa y beta, se separan en filtración en gel y se verifica su pureza por electroforesis en gel de poliacrilamida (8 a un 25 %). Posteriormente, se estima el peso molecular del hexámero y de sus subunidades. Como resultado se obtiene el hexámero de C-ficoc--anina puro con un peso molecular en 229 kDa y las subunidades alfa y beta, también puras, con un peso molecular de 17,92 y 19,85 kDa respectivamente.